分析内容
1. 数据质控
2. 蛋白功能注释:GO 注释、COG 注释、KEGG 注释、结构域注释
3.蛋白定量分析:蛋白定量结果、蛋白表达水平聚类分析、重复性分析
4. 蛋白差异分析:蛋白差异分析结果、差异蛋白火山图、差异蛋白聚类热图
5. GO 富集分析:GO 富集结果、GO 富集柱状图、GO 富集有向无环图、
6. KEGG 富集分析:KEGG 富集结果、KEGG 富集气泡图、KEGG 富集通路图
7. 结构域富集分析:结构域富集结果、结构域富集柱状图、差异蛋白互作分析、
8. 差异蛋白互作分析
9. 转录组关联分析
样本类型
蛋白质溶液,组织样品、细胞及体液样品(具体送样量请咨询各驻地项目经理)
代表性文章
Collins B C , Hunter C L , Liu Y , et al. Multi-laboratory assessment of reproducibility, qualitative and quantitative performance of SWATH-mass spectrometry[J]. Nature Communications, 2017, 8(1):291.
Rouwette T , Sondermann J , Avenali L , et al. Standardized profiling of the membrane-enriched proteome of mouse dorsal root ganglia provides novel insights into chronic pain[J]. Molecular & Cellular Proteomics, 2016, 15(6):mcp.M116.058966.
案例展示
蛋白定量DIA用于慢性疼痛的研究
Standardized Profiling of The Membrane-Enriched Proteome of Mouse Dorsal Root Ganglia (DRG) Provides Novel Insights Into Chronic Pain
研究背景
慢性疼痛是一种治疗方案有限的复杂疾病。虽对其发病机理进行了多次研究,但各结果间存在较大不一致性,主要受限于传统蛋白质组shotgun技术固有的缺陷。发病机制依然不清晰。
实验设计
炎症性疼痛和神经性疼痛两种模型鼠及其对应control鼠共4组,各3个生物学重复
每个生物学重复由10-13只鼠pooling而成
解剖获得同侧背根神经节膜部分提取蛋白进行DIA蛋白定量
图 实验设计类型
主要发现
1)DDA建库鉴定到3067个蛋白,迄今鉴定数最多的背根神经节蛋白研究。
2)DIA四组都鉴定到的蛋白有2526个,其中CFA和Vehicle都鉴定到的有2581个;SNI和Sham都鉴定到的2600个,表明实验重复性较好。
3)炎症性和神经性疼痛差异蛋白分别为64和77,两种模式共有差异蛋白为12个。
4)其中Serca蛋白在两种模式小鼠中表达量变化相反,表明两种疼痛的调控机制不同。
5)western blot和免疫组化对上述DIA结果进行了验证。
图 四组实验模型的蛋白聚类分析
参考文献
Rouwette T , Sondermann J , Avenali L , et al. Standardized profiling of the membrane-enriched proteome of mouse dorsal root ganglia provides novel insights into chronic pain[J]. Molecular & Cellular Proteomics, 2016, 15(6):mcp.M116.058966.