腺相关病毒（Adeno-Associated Viral Vector，AAV）属微小病毒科，是一类无法自主复制、无包膜的二十面体微小病毒，直径约为20-26nm，单链线状 DNA结构。
       目前AAV有13种血清型（即AAV1-AAV13），不同的血清型对组织或器官有着不同的亲和性，其中AAV2、AAV3、AAV9源自人类本身，是迄今研究最为彻底、应用最为广泛的腺相关病毒载体。

       目前临床研究中采用的重组腺相关病毒载体（Recombination adeno-associated virus, rAAV）是在非致病的野生型AAV基础上改造而成的基因载体。由于其种类多样、免疫原性极低、安全性高、宿主细胞范围广（对分裂细胞和非分裂细胞均具有感染能力）、扩散能力强、体内表达基因时间长等，rAAV被视为最有前途的基因研究和基因治疗载体之一。临床上，AAV在眼科疾病、神经系统疾病、代谢类疾病中广泛应用，是FDA批准上市的基因治疗药物中最安全的病毒载体之一。
       在AAV包装过程中，和元GMP平台采用三质粒系统，包装质粒负责编码外源目的基因以及两个末端反向重复序列（ITR，对于病毒的复制和包装具有决定性作用），辅助质粒包含AAV包装所需的 Cap（编码病毒衣壳蛋白）和 Rep（参与病毒的复制）基因，以及腺病毒Helper质粒。三种质粒在生物反应器中共同转染人源293T细胞，开始复制和大规模生产。
       和元GMP平台致力于前期改造AAV病毒载体、优化上游大肠杆菌发酵工艺和下游细胞培养技术，以提高AAV病毒载体的容量和特异性、提升质粒的产量和纯度以及病毒的滴度和纯度等指标。目前AAV病毒生产线可同时进行3-4批次连续生产，20-200L一次性反应器可实现细胞大规模培养及稳定生产。
 

服务
 

可提供产品（mL）	滴度（GC/mL）	病毒量（GC）	交付
详情咨询	详情咨询	详情咨询	GMP级腺相关病毒（AAV）、毒种库、细胞库、COA、批生产记录、批检验记录以及分析方法验证、稳定性研究等相关CMC材料

 

GMP腺相关病毒（AAV）生产流程
 

工艺开发及中试生产流程

GMP生产流程

质检

 

检测类别	检测项
定量	基因组滴度
	病毒计数
	总蛋白含量
鉴别	目的基因表达
	目标基因表达
活性	目标蛋白质表达
	细胞活性
纯度和杂质	293细胞宿主蛋白残留量
	293细胞宿主DNA残留量
	牛血清白蛋白残留检测
	残留核酶
	残留质粒
	分子量分布纯度
	实心病毒纯度
	外壳蛋白质纯度
安全性	无菌检查
	细菌内毒素
	支原体
	异常毒性
	复制完整性腺相关病毒
其他检测	pH值
	外观
	可见异物
	不溶性微粒
	装量
	渗透压

 

周期
 

IND项目周期表

优势
 

• GMP质量管理体系，质量控制与放行严格；
• 全封闭一次性细胞工厂, 大规模连续生产；
• 不同批次间稳定生产；
• 病毒纯度高，杂质含量低，安全性好；
• 整体病毒收率高于行业水平；
• 生产工艺成熟稳定，节省时间、降低成本。