慢病毒系列|体内“追踪器”
在肿瘤研究中,研究者通常需要在体内开展肿瘤发生、发展及转移的示踪实验。对于此类实验,人们可借助携带萤光素酶(luciferase)基因、荧光蛋白基因的慢病毒感染肿瘤细胞系,构建可表达萤光素酶、荧光蛋白的稳定细胞株,并借助细胞的体内成瘤动物模型构建,完成肿瘤细胞的示踪。
基于此,和元生物的研发团队不断改进三标慢病毒,现拥有3.0版本的新型三标慢病毒携带荧光蛋白(荧光更强)、萤光素酶(表达量更高)、抗性基因用于活体成像、体内示踪肿瘤的发生及转移。
三标慢病毒的迭代升级
荧光结果
携带萤光素酶基因的肿瘤细胞系接种到小鼠原位器官或者组织进行荷瘤,借助萤光素酶与萤光素酶底物的反应原理,可通过活体成像技术观察肿瘤大小及转移等情况。
肿瘤的体内发展
发表期刊:Theranostics
IF:11.6
客户及单位:齐鲁医院李新钢教授&王剑教授
本文探索NONO对脑胶质瘤(GBM)进展的影响。通过慢病毒同时携带干扰NONO序列以及Luciferase编码序列感染GBM细胞(P3患者来源、U251为细胞系)构建稳定细胞系,小鼠麻醉后经额叶注射表达Luciferase的稳定细胞系(5 × 105 cells/10 μL PBS)。对原位移植模型进行生物发光体内成像检测。结果显示:原位移植瘤生长受抑制,荷瘤小鼠的总生存期延长,NONO的缺失进一步抑制了GBM在体内的发展。
敲低NONO可抑制GBM细胞的增殖和侵袭(PMID:35910786)
细胞的体内迁移
发表期刊:Nat Commun
IF:17.694
客户及单位:中山大学第八附属医院沈慧勇教授
本篇文章探索TNF-α对强直性脊柱炎(AS)患者的骨髓间充质干细胞(MSC)的作用。通过慢病毒携带luciferase感染MSC,将5 × 105 MSC-luc移植到裸鼠背侧皮下,并在MSC周围注射TNF-α,然后进行生物发光体内成像检测。结果显示:相较于HC-MSC(健康样本),TNF-α可促进AS-MSC在体内的定向迁移。
TNF-α可促进AS-MSC在体内的定向迁移(PMID:34508078)
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